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閱讀次數(shù):1366 發(fā)布時(shí)間:2012/10/8 10:00:21
考馬斯亮藍(lán)染色:(凝膠)
1)結(jié)合225毫升甲醇225毫升ddh2o。
2)加0.5克考馬斯亮藍(lán)。
3)使用前,加入50毫升乙酸終濃度10%。
4)染色2小時(shí)。染色時(shí)間可以縮短50秒微波;~中等功率。
5)染色后,倒出濾入瓶標(biāo)使用的染色。染色可重復(fù)使用一次,但新鮮10%醋酸必須添加)。
考馬斯亮藍(lán)脫色:(凝膠)
1)結(jié)合25毫升甲醇437.5毫升ddh2o。
2)使用前,加入37.5毫升乙酸終濃度7.5%。
3)脫色,加海綿(件泡沫包裝)幾個(gè)小時(shí)。它可能需要使用一個(gè)以上的變化退色。微波可以用在這個(gè)階段,但細(xì)節(jié)尚未確定。
考馬斯亮藍(lán)染色:(膜)
1)結(jié)合50毫升甲醇50毫升ddh2o。
2)加0.1克,考馬斯亮藍(lán)。
3)染色澆足夠數(shù)量的膜覆蓋在培養(yǎng)皿。
4)清洗液輕輕來(lái)回膜。讓它浸泡一兩分鐘。
5)處理染色方式相似,為凝膠染色。
透析管準(zhǔn)備
1)切管適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度和發(fā)生在一個(gè)大燒杯。
2)加上足夠的5%碳酸氫鈉(添加50克每升ddh2o)覆蓋管。
3)煮滾,讓它煮15分鐘。油管浮地方燒杯內(nèi)下一個(gè)較小的尺寸上的油管。
4)沖洗管與過(guò)量的ddh2o。
5)浸泡在管2毫米四乙酸(加10毫升0.2米1升的ddh2o)一個(gè)小時(shí)。
6)再次沖洗與過(guò)量的ddh2o。
7)存放在0.05%疊(加0.005毫升每公升ddh2o)。
倒堆疊凝膠…
0.4mls丙烯酰胺
0.4mls 10電泳緩沖液
40uls 10%十二烷基硫酸鈉
3.12mls ddh20
2uls定時(shí)
34uls黃芪多糖
如何使15%小型凝膠
* * * *的重要原因,丙烯酰胺是被使用,它是非常重要的,戴上手套,整個(gè)程序。
1)測(cè)量出5.152-ml ddh2o到無(wú)菌15-ml-tube。
2)加4.58-ml丙烯酰胺。
3)下添加1.1-ml 10分離緩沖液。
4)添加110毫升10%十二烷基硫酸鈉。
5)繼續(xù)加入56-ml黃芪多糖。
6)*后,添加5.6-ml定時(shí)。(注:定時(shí)的聚合劑,以下步驟必須做得相當(dāng)迅速。)
7)使用一次性吸管,同質(zhì)化的解決方案,以免造成任何氣泡。
8)使用相同的吸管填充玻璃留下約1英寸的頂部。
9)*后,加入0.5英寸的水飽和正丁醇在頂部的凝膠。注:離開(kāi)未使用部分的解決方案在15毫升管。使用此確定如果你的凝膠準(zhǔn)備使用(當(dāng)管聚合,所以是你的凝膠)。
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