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瓊脂糖凝膠4B使用說(shuō)明

點(diǎn)擊次數(shù):15625   發(fā)布時(shí)間:2012/8/2 10:53:04

我公司供應(yīng)各種瓊脂糖凝膠:瓊脂糖凝膠2B、瓊脂糖凝膠4B、瓊脂糖凝膠6B、瓊脂糖凝膠CL-2B、瓊脂糖凝膠CL-4B、瓊脂糖凝膠CL-6B、瓊脂糖凝膠4FF、瓊脂糖凝膠6FF、Q瓊脂糖凝膠HP、Q瓊脂糖凝膠FF、SP瓊脂糖凝膠FF、DEAE瓊脂糖凝膠FF、CM瓊脂糖凝膠FF、DEAE瓊脂糖凝膠CL-6B、CM瓊脂糖凝膠CL-6B
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瓊脂糖凝膠4B是用4%濃度瓊脂糖制備成的球型顆粒,作為凝膠層析介質(zhì)使用。
1. 外觀
本品為乳白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)。
2. 理化指標(biāo)
項(xiàng)       目指       標(biāo)
基質(zhì)4%瓊脂糖凝膠
排阻極限60000~20×106 (球蛋白)
形狀球型
粒徑45~165 μm
流速70-140 cm/h*
耐壓0.03 MPa
耐熱pH7水中45℃24h
pH適用范圍4~9 (長(zhǎng)時(shí)間), 3~11(短時(shí)間,在位清洗)
化學(xué)穩(wěn)定性可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍

 *檢測(cè)條件: 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl
3. 包裝
產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標(biāo)簽,注明“品名、體積、顆粒大小、” 等內(nèi)容。
4. 貯存
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。
用過(guò)的柱子貯存在4℃(20% 乙醇)。
5. 注意事項(xiàng)
本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中
6.運(yùn)輸
運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
7.保質(zhì)期
5年。
8.應(yīng)用
本產(chǎn)品為傳統(tǒng)的瓊脂糖介質(zhì),非特異性吸附低,回收率高,可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),用于分子量差異大、對(duì)分辨率要求不高的樣品的凝膠層析純化。下面簡(jiǎn)要介紹介質(zhì)的使用過(guò)程。
8.1 裝柱
凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。
以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。
⑴讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
 ⑵選擇一根一定直徑的柱子,長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。勻漿作脫氣處理。不要?jiǎng)×覕噭?dòng),以免攪壞微球。
⑶將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
⑷  用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開(kāi)柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
⑸ 打開(kāi)蠕動(dòng)泵,讓緩沖液緩慢流過(guò),使柱床穩(wěn)定。
⑹用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
8.2平衡
讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。
8.3上樣
⑴樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。
⑵介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。
⑶上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
8.4洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
8.5再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
8.6注意:在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。
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原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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