在保存血清的過(guò)程中,相信大家難免會(huì)想到些問(wèn)題,比如:溫度多少合適?為什么要熱滅活?等等。產(chǎn)品的保存方法與質(zhì)量有著莫大的關(guān)系,天我公司技術(shù)員特別將常見(jiàn)問(wèn)題整理出分享給大家:
1. 問(wèn):保存血清比較好的方法是怎樣的呢?
答:我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)個(gè)月。若您次無(wú)法用完瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2. 問(wèn):如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損?
答:我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
3. 問(wèn):血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的品質(zhì)。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。
4. 問(wèn):為什么要熱滅活?
答:加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。
5. 問(wèn):有必要做熱滅活嗎?
答:實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓钠焚|(zhì),而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。 因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這步。如此來(lái),不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保血清的品質(zhì)!
6. 問(wèn):為什么儲(chǔ)存在冰箱中的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?
答:我們的胎牛血清沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的品質(zhì)。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。
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