一、原料處理：將新鮮的豬腸（或冷凍豬腸自然解凍之后）用清水仔細(xì)清洗去除內(nèi)外污物和外部皮膚脂肪后，絞碎成糜狀，并在充分?jǐn)嚢柘�，加入等量的水混合后，再加入少許溶度為0.1%的防腐劑混合均勻。

    二、離子交換吸附：先將上述酶解提取液冷卻至室溫，仔細(xì)撈除浮于液面的油脂薄片層，控制升溫至45度，停止加熱，在攪拌下加入事先預(yù)處理好的D-254型樹脂已有效的吸附料液中的肝素鈉成分，新樹脂的用量一般為料液的2.55-3%，用過后的再生熟知應(yīng)酌情加大其用量，攪拌、吸附處理3個(gè)小時(shí)后靜置過濾，濾液可作為生產(chǎn)治療冠心病的新藥冠心舒的原料。

    將上述已經(jīng)吸附有肝素成分的D-254樹脂先用清水充分漂洗，干凈后，再用大約一倍的1.2mol/L氯化鈉溶液對洗滌好的D-254樹脂進(jìn)行肝素鈉操作：*次洗脫液為樹脂體積的1.5倍左右，大約洗脫4小時(shí)，第二次洗脫為樹脂體積的0.5倍左右 ，洗脫時(shí)間為1小時(shí)。濾干樹脂，將洗脫液予以合并。 將上述所得的洗脫液調(diào)節(jié)到PH=10-11，攪拌30分鐘后，靜置6小時(shí)，然后仔細(xì)的析出上層清液，下部沉淀物盡量的抽濾至干。合并清液和濾液，精細(xì)調(diào)節(jié)PH=6.0-6.5，加入1.5倍量的95%乙醇沉淀過夜，翌日，仔細(xì)地烘吸出上層清液，收集下部沉淀物，抽濾至干（母液可套用于調(diào)PH值前的洗脫液中）。經(jīng)真空烘干，即得肝素鈉粗品。

    三、酶解提取：先將上述原料在充分?jǐn)嚢柘�，用少量稀堿液精細(xì)地調(diào)節(jié)至PH值為8-9（可用相應(yīng)的精密PH試紙進(jìn)行測定，下同）再加入事先已經(jīng)絞碎的新鮮胰漿作為酶解劑（所加入的豬胰漿按照原料液實(shí)際重量的1%-1.5%為宜），攪勻后，緩慢升溫至40度左右，繼續(xù)攪拌，并保持料液PH=7.5-8，保持液溫于37-40度下，酶解3-4小時(shí)，然后升溫至47-50度，維持PH值=8.0-8.5，再酌情補(bǔ)加少許豬胰漿后，繼續(xù)酶解4-5小時(shí)，在上述酶解過程中，如果酶解料液的PH紙復(fù)查有所下降之際，句應(yīng)該及時(shí)用少許稀堿液（5%-8%NaOH溶液）仔細(xì)調(diào)整。鹽酸調(diào)整其PH=5.5-6，然后升溫至80度。在充分?jǐn)嚢柘拢�加入料液總重�?%左右的精鹽（含NaCL≥95%，鈣鎂鈣鹽<0.5%），使之混溶均勻后，再升溫90度，保溫30分鐘，停止攪拌，趁熱過濾除去雜質(zhì)，待濾液冷卻至37度時(shí)，用稀堿液調(diào)整其PH=10.5，精細(xì)過濾，濾液回調(diào)其PH=9.0-9.5范圍內(nèi)進(jìn)行離子交換吸附處理。

    四、精制：將所得肝素鈉粗品用2%的氯化鈉溶液完全溶解，制成其溶度大約為8%的溶液，在此過程中可適當(dāng)?shù)纳郎刂�溶�?將上述料夜用5mol/L氫氧化鈉溶液精細(xì)地調(diào)節(jié)PH=8.0-8.2，升溫至78-80度，按照每一億單位加入0.15-0.2mol/L高錳酸鉀溶液至紫紅色不再褪色時(shí)即為*次氧化操作的終點(diǎn)；再加入少許飽和的亞硫酸鈉溶液以紅色剛好褪盡時(shí)為宜。待上述料液適當(dāng)冷卻后，精細(xì)過濾一次，當(dāng)其濾液溫度下降至36度時(shí)，復(fù)濾一次，將濾液用少許飽和的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH=10.5-11.0，在充分?jǐn)嚢柘�，緩慢的加入少量�?%-5%過氧化氫溶液，在25-27度下進(jìn)行第二次氧化，時(shí)間為16-24小時(shí)，當(dāng)氧化過程結(jié)束后，將料液用“除菌過濾器”過濾，濾液用少許鹽酸調(diào)節(jié)至PH=5.8-6.5，加入0.9倍量的95%乙醇，于5-10度條件下沉淀處理24小時(shí)。 收集上述沉淀物，用少量10%氯化鈉溶液溶解后，再加上3-4倍的95%乙醇進(jìn)行沉淀，收集沉淀物（乙醇加以回收、蒸餾、脫水后，可循環(huán)套用）。沉淀物經(jīng)無水乙醇脫水，研細(xì)，再經(jīng)丙酮脫水，研細(xì)，再經(jīng)丙酮脫水，遠(yuǎn)紅外線真空烘干（50-60度），即得肝素鈉精品。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司