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技術(shù)文章

詳細講解PCR檢測試劑盒實驗的注意事項！

點擊次數(shù)：15567 發(fā)布時間：2019/3/19 8:58:53

春天的江南是美麗的，風(fēng)很柔和，空氣很清新，太陽很溫暖；大田里的麥苗像一片海，星羅棋布的村莊是不沉的舟，縱橫交錯的彎彎曲曲的河道，河邊的柳枝吐了嫩芽，蘆葦邊鉆出來放時透青了；河道里平靜的水，從冬天的素凈中蘇醒過來，被大自然的色彩打扮得青青翠翠。接下來小編詳細講解,PCR檢測試劑盒實驗需要注意的細節(jié)有哪些？
PCR檢測試劑盒實驗的注意事項：
1.整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
10. 儲存條件及有效期避光-20℃以下保存，避免反復(fù)凍融，有效期12個月。
11.【適用儀器】ABI 系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等多通道實時熒光定量PCR儀。

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