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微生物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒實驗原理及注意事項

點擊次數(shù)：14955 發(fā)布時間：2015/11/12 9:58:57

*近咨詢微生物試劑盒的客戶還挺多的，在10月底的時候已經(jīng)有好幾個客戶在我司訂購了幾個微生物elisa試劑盒，在訂購微生物試劑盒之前有的客戶問到實驗過程中應(yīng)注意哪些問題，下面是我司錢經(jīng)理為客戶提供的微生物試劑盒注意事項。

微生物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒實驗原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中過氧化氫酶（CAT）水平。用純化的過氧化氫酶

（CAT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入過氧化氫酶（CAT），

再與HRP 標(biāo)記的過氧化氫酶（CAT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底

洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*

終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫酶（CAT）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長

下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中過氧化氫酶（CAT）濃度。

微生物過氧化氫酶（CAT）ELISA試劑盒注意事項：

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未

用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計

算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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