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技術(shù)文章

恒遠與您分享抗血清的制備方法

點擊次數(shù):14815   發(fā)布時間:2015/8/18 10:47:28

    昨日,來自沈陽農(nóng)業(yè)大學周老師來電咨詢抗血清的制備方法和過程,我司錢經(jīng)理熱情地一一解答。
    抗血清指含有抗體的血清。 傳統(tǒng)的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動物,數(shù)十天后或數(shù)月后,采集動物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應(yīng)用前必須作效價和特異性鑒定及純化。 

(一)免疫動物的選擇 

免疫動物的選擇基本要求: 

1.抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。 

2.動物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。 

3.不同動物對同一免疫原有不同的免疫應(yīng)答表現(xiàn)。因此針對不同性質(zhì)的免疫原,選用相應(yīng)的動物。蛋白質(zhì)抗原大部分動物皆適合;甾類激素多用家免;酶類多用豚鼠。 

4.抗血清要求:為R(rabbit)型或H(horse)型血清。R型抗血清是以家兔為代表的小型動物產(chǎn)生的抗血清,能和很小量抗原結(jié)合形成沉淀線,而H型抗血清則以馬為代表的大型動物產(chǎn)生的抗血清,較少用于沉淀反應(yīng)。 

此外需要制備大量免疫血清時,應(yīng)選用馬、綿羊等大動物;若需要量不多,則選用家兔、豚鼠和雞等小動物。
(二)免疫方法及途徑 

1.免疫原的注射劑量:應(yīng)考慮抗原性強弱、分子量大小、動物的個體狀態(tài)和免疫時間?贵w需要量多,時間間隔長,劑量可適當加大。 

2.免疫途徑:通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)及足掌等。若抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法;半抗原宜皮內(nèi)多點注射。 

3.免疫方案:根據(jù)設(shè)計的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類來制定免疫方案?刹捎萌棵庖叻、微量免疫法或混合免疫法。 

4.抗體產(chǎn)生階段:可分靜止期(約2天,血中尚無抗體);指數(shù)期(約4天左右,抗體迅速上升);穩(wěn)定期(約2~4周,抗體保持一個穩(wěn)定水平);下降期(約幾個月后,此時抗體緩慢下降)四個階段。 

(三)動物采血法 

動物采血法有頸動脈放血法、心臟采血法、靜脈多次采血法等。 

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  試劑盒:elisa試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、放免試劑盒、分子生物學試劑盒、金標檢測試劑盒、Omega試劑盒、細胞凋亡試劑盒、生化試劑盒。
      各種動物血清:內(nèi)皮細胞專用血清、HyClone、GIBCO胎牛血清?贵w:進口原裝抗體、進口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標抗體、雙標抗體、多標抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細胞抗體、免疫細胞化學抗體。細胞:原裝進口細胞、腫瘤細胞、正常細胞、腫瘤耐藥細胞

         生化試劑:原裝進口生化試劑、進口分裝生化試劑。

原創(chuàng)作者:上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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